
Aminokyseliny jsou klíčovými stavebními kameny života a hrají klíčovou roli v různých metabolických drahách. Vzhledem k jejich chemické složitosti a dynamickému rozsahu je jejich spolehlivá kvantitativní a kvalitativní analýza v biologických tekutinách a tkáních zásadní pro nutriční informace, identifikaci sloučenin a diagnostiku.
Za tímto účelem byla vyvinuta jednoduchá, elegantní a dosud nejrychlejší metoda pro analýzu aminokyselin. Kit MetAmino® na bázi LC/GC-MS nabízí komplexní řešení pro 75 metabolitů včetně základních proteinogenních aminokyselin, biogenních aminů a koenzymů s možností dalšího rozšíření analytů.
Obr. 1: Chromatogram vnitřních standardů, SD1 a SD2. Separace 5 nmol aminokyselin pomocí LC-MS MetAmino®
Obr. 2: Chromatogram reálného vzorku: Separace aminokyselin ve vzorku piva Budvar 12˚ (25 µl vzorku bylo nastříknuto na kolonu). Vysoká účinnost naší kolony a vysoké rozlišení přispívají k pěkné separaci píků. Vzorek testován pomocí LC-MS MetAmino®
Obr. 3: Chromatogram reálného vzorku: Separace aminokyselin přítomných v krevním séru (25 µL vysráženého séra bylo nastříknuto na kolonu). Vysoká účinnost naší kolony a vysoké rozlišení přispívají k pěkné separaci píků. Vzorek testován pomocí LC-MS MetAmino®
Níže je uvedený stručný postup přípravy vzorku. Podrobný postup naleznete v uživatelské příručce MetAmino®.
MetAmino® kit obsahuje všechna činidla, média a chemikálie. Obsah startovací sady je uveden v tabulkách níže:
Položka | Typ vialky | Objem ve vialce (ml) | Počet vialek (100 vzorků) |
Standardy aminokyselin SD1 roztok | 2 ml vialka | 0,25 | 1 |
Standardy aminokyselin SD2 v práškové formě | 2 ml vialka | - | 2 |
Roztok s vnitřními standardy (IS) | 2 ml vialka | 1,1 | 1 |
Aminokyselinové standardní ředící médium (AASDM) | 4 ml vialka | 1,4 | 1 |
Aktivační médium sorbentu MSPE (WES) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Ekvilibrační médium sorbentu MSPE (EQS) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Katalytický roztok (CTS) | 4 ml vialka | 2,2 | 1 |
Reagenční (derivatizační) činidlo (RDS) | 4 ml vialka | 1,1 | 1 |
Ředicí a promývací médium (DWM) | 40 ml vialka | 33 | 2 |
Eluční médium (ELM) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Precipitační médium (PM) | 40 ml vialka | 11 | 1 |
Položka | Množství (100 vzorků) | Poznámka |
MetAmino® HPLC kolona | 1 ks | Speciální stacionární fáze |
Stojánek až pro 80 centrifugačních zkumavek | 1 ks | |
Microspin filtry se sorbentem MetAmino® | 100 ks | Vnitřní kolonka vč. 0,22µm membrány |
Centrifugační zkumavky (2 ml) | 400 ks | |
Autosamplerové vialky (9 mm šroubovací uzávěr) | 100 ks | Včetně sept a víček |
Položka | Typ vialky | Objem ve vialce (ml) | Počet vialek (100 vzorků) |
Standardy aminokyselin SD1 (roztok) | 2 ml vialka | 0,25 | 1 |
Standardy aminokyselin SD2 v práškové formě | 2 ml vialka | - | 2 |
Roztok s vnitřními standardy (IS) | 2 ml vialka | 1,1 | 1 |
Aminokyselinové standardní ředící médium (AASDM) | 4 ml vialka | 1,4 | 1 |
Redukční činidlo (RA) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Základní roztok (BM) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Katalytický roztok (CTS) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Reagenční (derivatizační) činidlo (RDS) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Extrakční médium (EM) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Kyselé médium (AM) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Položka | Množství | Poznámka |
MetAmino® GC kolona | 1 ks | Speciální stacionární fáze |
Reakční skleněné zkumavky | 100 ks | - |
Stojánek až pro 80 reakčních zkumavek | ||
Autosamplerové vialky (9 mm šroubovací uzávěr) | 100 ks | Včetně sept a víček |
Inserty do vialek autosampleru | 100 ks | - |
Naše sady MetAmino® LC-MS a GC-MS poskytují rychlou, robustní, reprodukovatelnou a precizní metodu pro analýzu aminokyselin, která zahrnuje jak přípravu vzorků, tak i chromatografickou separaci.
Metoda využívající LC-MS je založena na mikro-extrakci na pevné fázi využívající speciální mikrospin filtry (MSPE) s nově vyvinutým sorbentem a integrovanou membránou 0,22 µm, metoda GC-MS využívá pro přípravu mikroextrakci kapalina-kapalina (LLME). Po této předúpravě je vzorek analyzován v LC-MS (GC-MS). Celkově trvá příprava vzorku pro LC-MS asi 8 minut a analýza vzorku 12 minut, takže celá doba experimentu je pouhých 20 minut. Celková doba experimentu GC-MS je dokonce kratší – zhruba 17 minut.
Tato jedinečná sada splňuje všechny požadavky laboratoří a je navržena pro všechny koncové uživatele, kteří hledají jednoduchou analytickou metodu a vysokou účinnost separace.
Sorbenty pro techniku MSPE jsou zvoleny tak, aby pokryly co nejširší pole aplikací. MSPE SpeExtra C18 je hydrofóbní typ oktadecyl silikagelu se speciálním endcappingem s velmi širokým uplatněním. Je vhodný pro celou řadu analytů, horší retenci vykazuje pro polární sloučeniny. MSPE SpeExtra C18-P je polárně modifikovaný monomerní oktadecyl silikagel . Nabízí různé typy interackí: dipól-dipól, π- π a hydrofóbní. Je tedy vhodný pro aromatické a polární sloučeniny. MSPE SpeExtra HLB polymerní sorbent s vysokým měrným povrchem a speciálním endcapoingem. Má hydrofilní a lipofilní modifikaci zajišťující univerzální použití a vyšší kapacitu než C18 silikagel.
MSPE sorbent | Velikost částic [µm] | Měrný povrch [m2/g] | ||
C18 | 60 | 310 | ||
C18-P | 60 | 310 | ||
HLB | 30 | 850 |
Konopí obsahuje stovky kanabinoidů, přičemž kanabidiol (CBD) je v rostlině nejrozšířenější a Δ 9-Tetrahydrocannabinol (THC) je aktivní složkou způsobující psychotropní účinky. Existuje však mnohem více sloučenin, které jsou vytvářeny rostlinou konopí a byly zkoumány pro jejich lékařské účinky. Tento limit často vyžaduje úpravu destilovaného konopného extraktu (odstranění THC z výchozího extraktu) a lze ji dosáhnout pomocí preparativní chromatografie, např. pomocí systému puriFlash® XL-Cannabis. HPLC analýza výchozího materiálu (destilátu), frakcí shromážděných během procesu čištění a konečného produktu může být provedena analytickým systémem Advion AVANT HPLC-UV. Jak čištění, tak analytické metody jsou uvedeny v této božuře a tvoří kompletní řešení pro odstranění THC v konopném průmyslu.
Na této stránce uvádíme přehled nabízených kolonek pro extrakci na pevné fázi (SPE) včetně technických parametrů. Další informace k produktům najdete v katalogu zboží, ve kterém jsou uvedeny SPE kolonky a disky, dSPE produkty, manifoldy, produkty pro on-line SPE a vakuová čerpadla.
Phase | Particle size (µm) | Pore Size (A) | Surface Area (m2/g) | Carbon Load (%) | End Capping | Feature |
---|---|---|---|---|---|---|
C2 Ethyl | 60 | 500 | 6,6 | YES/NO | ||
C4 n-Butyl | 60 | 500 | 8,5 | YES | ||
C8 Octyl | 60 | 500 | 11,1 | YES/NO | ||
C18 Octadecyl | 60 | 500 | 21,7 | YES/NO | ||
C30 Tricontyl | 60 | 500 | 20,0 | YES | ||
Cyclohexyl | 60 | 500 | 11,6 | YES/NO | ||
Phenyl | 60 | 500 | 11,0 | YES/NO |
Phase | Particle size (µm) | Pore Size (A) | Surface Area (m2/g) | Carbon Load (%) | Feature | |
---|---|---|---|---|---|---|
Silica | 0,77 | 60 | 500 | N/A | ||
Diol | 0,77 | 60 | 500 | 8,0 | ||
Cyanopropyl | 0,77 | 60 | 500 | 9,0 | ||
Florisil | 0,82 | 60 | 500 | N/A | ||
Alumina, Acidic | 60 | 500 | N/A | |||
Alumina, Basic | 60 | 500 | N/A | |||
Alumina, Neutral | 60 | 500 | N/A | |||
Carbon | N/A | 120/140 mesh |
Phase | Pore volume (cm3/g) | pKa | Pore Size (A) | Surface Area (m2/g) | Carbon Load (%) | Exchange (meq/g) |
---|---|---|---|---|---|---|
Aminopropyl (1 amine) | 0,77 | 9.8 | 60 | 500 | 6,65 | 0,31 |
N-2 Aminoethyl (1/2 amine) | 0,77 | 10.1; 10.9 | 60 | 500 | 11,1 | 0,32 |
Diethylamino (3 amine) | 0,77 | 10.6 | 60 | 500 | 10,6 | 0,28 |
Quarternary Amine Chloride | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 8,4 | 0,25 |
Quarternary Amine Hydroxide | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 8,4 | 0,25 |
Quarternary Amine Acetate | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 8,4 | 0,25 |
Quarternary Amine Formate | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 8,4 | 0,25 |
Polyimine | 0,77 | Always charged | 13,5 | 0,25 |
Phase | Pore volume (cm3/g) | pKa | Pore Size (A) | Surface Area (m2/g) | Carbon Load (%) | Exchange (meq/g) |
---|---|---|---|---|---|---|
Carboxylic Acid | 0.77 | 4.8 | 60 | 500 | 9,2 | 0,17 |
Propylsulfonic Acid | 0.77 | 1 | 60 | 500 | 7,1 | 0,18 |
Benzenesulfonic Acid | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 11,0 | 0,32 |
Benzenesulfonic Acid, High Load | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 15,0 | 0,65 |
Triacetic Acid | 0,77 | 60 | 500 | 7,61 | Anion 0,17/Cation 0,06 |
Phase | Pore volume (cm3/g) | pKa | Pore Size (A) | Surface Area (m2/g) | Carbon Load (%) | Exchange (meq/g) |
---|---|---|---|---|---|---|
Aminopropyl + C8 | 0.77 | 9,8 | 60 | 500 | 12,3 | 0,163 |
Quarternary Amine + C8 | 0.77 | Always charged | 60 | 500 | 13,6 | 0,160 |
Carboxylic Acid + C8 | 0.77 | 4,8 | 60 | 500 | 2,5 | 0,105 |
Propylsulfonic Acid + C8 | 0.77 | 1 | 60 | 500 | 14,62 | 0,114 |
Benzenesulfonic Acid + C8 | 0,77 | Always charged | 60 | 500 | 12.3 | 0,072 |
Cyanopropyl + C8 | 0,77 | N/A | 60 | 500 | 14,6 | 0,163 |
Cyclohexyl + C8 | 0.77 | N/A | 60 | 500 | N/A | N/A |