0 Porovnat
Přidejte si do porovnání produkty pomocí ikonky vah a zde si poté můžete porovnat jejich parametry.
Uživatel
0 Košík
Váš košík je prázdný...

HPLC závady a jejich odstranění

Abnormální tlak

Žádné čtení tlaku, žádný průtok
Možná příčina Řešení
Vypnout Zapněte napájení
Spálená pojistka Vyměňte pojistku
Nastavení nebo porucha ovladače Ověřte správná nastavení, opravte nebo vyměňte ovladač
Zlomený píst Vyměňte píst
Vzduch zachycený v hlavě čerpadla Odplyněte mobilní fázi, vypusťte vzduch z čerpadla a naplňte čerpadlo
Nedostatečná mobilní fáze Doplňte zásobník, vyměňte vstupní fritu, pokud je ucpaná
Vadné zpětné ventily Vyměňte zpětné ventily
Velký únik Utáhněte nebo vyměňte armatury
Pomoc Nyní odečteme tlak, průtok je normální
Možná příčina Řešení
Vadný měřič Vyměňte měřič
Vadný převodník tlaku Vyměňte převodník

Vysoký protitlak
Možná příčina Řešení
Průtok je nastaven příliš vysoko Upravte nastavení
Zablokovaná sloupcová frita Proveďte zpětné propláchnutí kolony, pokud je to povoleno, vyměňte fritu podle pokynů výrobce a záručních podmínek nebo kolonu vyměňte
Nesprávná mobilní fáze, vysrážený pufr Použijte správnou mobilní fázi, promyjte kolonu
Nevhodný sloupec Použijte správný sloupec
Zablokování vstřikovače Odstraňte ucpání nebo vyměňte vstřikovač
Teplota kolony je příliš nízká Zvyšte teplotu
Porucha ovladače Opravte nebo vyměňte ovladač
Zablokovaný ochranný sloup Odstraňte/vyměňte ochranný sloup
Blokovaný in-line filtr Vyjměte/vyměňte in-line filtr

Měli byste zjistit, co způsobilo vysoký protitlak - sloupec nebo systém? Doporučujeme následující postup:

Vyjměte kolonu ze systému a zapněte čerpadlo. Pokud se stále objevuje vysoký protitlak, pak je zablokování v systému:

  • ucpané nebo zvlněné potrubí
  • špinavá frita čerpadla
  • nebo ucpaný vstřikovací ventil

Pokud je tlak normální, je problém se sloupcem:

  • ucpaný nebo poškozený předkolonový filtr, ochranná kolona nebo frita
  • precipitace vzorku nebo pufru v koloně
Nízký protitlak

tlak

Možná příčina Řešení
Průtok je nastaven příliš nízko Upravte průtok
Únik v systému Najděte a opravte
Nevhodný sloupec Použijte správný sloupec
Teplota kolony je příliš vysoká Nižší teplota
Porucha ovladače Opravte nebo vyměňte ovladač
Kolísavý tlak

Viz část Vysoký protitlak .

Tlak klesá na nulu

Viz části Žádný odečet tlaku, žádný průtok a Žádný odečet tlaku, průtok je normální

Tlak klesá, ale ne na nulu

Viz část Nízký tlak

Cyklování tlaku
Možný případ Řešení
Vzduch v čerpadle Odplyněte rozpouštědlo a/nebo vypusťte vzduch z čerpadla
Vadný zpětný ventil(y) Vyměňte zpětný ventil(y)
Selhání těsnění čerpadla Vyměňte těsnění čerpadla
Nedostatečné odplynění Odplyněte rozpouštědlo a/nebo změňte metody odplynění (např. použijte vakuový odplyňovač)
Únik v systému Najděte netěsnost a opravte ji
Použití gradientové eluce Cyklování tlaku je normální kvůli změně viskozity

Netěsnosti

Úniky se obvykle zastaví dotažením nebo výměnou armatury. Uvědomte si však, že příliš utažené kovové svěrné spojky mohou prosakovat a plastové spojky se mohou opotřebovat. Pokud se netěsnost armatury nezastaví ani po mírném utažení armatury, rozeberte armaturu a zkontrolujte, zda není poškozená (např. zdeformovaný kroužek nebo částice na těsnicí ploše). Pokud je armatura nebo objímka poškozena, vyměňte ji za novou.

Netěsné armatury

Možná příčina Řešení
Volné kování Utáhněte armaturu
Odizolovaná armatura Vyměňte armaturu
Příliš utažené kování Uvolněte a znovu utáhněte armaturu. Pokud je armatura poškozena, vyměňte ji.
Špinavá armatura Demontujte armaturu a vyčistěte ji. Pokud je armatura poškozena, vyměňte ji.
Neodpovídající díly Používejte všechny díly stejné značky/typu.
Netěsnosti na čerpadle
Možná příčina Řešení
Uvolněné zpětné ventily Utáhněte zpětný ventil (nepřetahujte) nebo vyměňte zpětný ventil
Volné kování Utáhněte armatury (neutahujte příliš)
Porucha těsnění směšovače Opravte nebo vyměňte
Selhání těsnění čerpadla Opravte nebo vyměňte těsnění
Selhání tlumiče impulsů Vyměňte tlumič pulzů
Porucha proporcionálního ventilu Zkontrolujte membrány, vyměňte je, pokud jsou netěsné a/nebo zkontrolujte, zda nejsou poškozené, vyměňte je
Vypouštěcí ventil Utáhněte ventil nebo jej vyměňte, pokud je vadný
Netěsnosti vstřikovače
Možná příčina Řešení
Selhání těsnění rotoru Přestavte nebo vyměňte rotor
Blokovaná smyčka Vyčistěte nebo vyměňte smyčku
Uvolněné těsnění portu vstřikovače Upravit
Nesprávný průměr jehly injekční stříkačky Použijte správnou injekční stříkačku
Odpadní potrubí sifonování Odpadní vedení udržujte nad povrchem rozlehlé, se správným sklonem
Zablokování odpadního potrubí Vyměňte odpadní vedení
Sloupec netěsní

otazník

Možná příčina Řešení
Volné zakončení Utáhněte koncovku
Těsnění sloupu v objímce Demontujte, opláchněte objímku, znovu složte
Nesprávná tloušťka frity Použijte správnou fritu (*)

*Poznámka: Pokud je velikost částic stacionární fáze 3 až 4 µm, použijte fritu 0,5 µm. Pokud je velikost částic stacionární fáze 5 až 20 µm, použijte fritu 2 µm.

Netěsnosti detektoru
Možná příčina Řešení
Selhání těsnění článku Zabraňte nadměrnému zpětnému tlaku nebo vyměňte těsnění
Prasklé okno(a) buňky Nahradit okna buněk
Netěsné armatury Utáhněte nebo vyměňte armatury
Ucpané odpadní vedení Vyměňte odpadní vedení
Blokujte průtokovou buňku Přestavte nebo vyměňte průtokovou celu

Problémy s chromatogramem

Mnoho problémů v systému LC se projevuje jako změny v chromatogramu. Některé z nich lze vyřešit změnami v přístroji, jiné problémy však vyžadují úpravu postupu stanovení. Nastavení správného typu kolony, předkolony nebo ochranné kolony, hadiček, detekční cely a mobilní fáze jsou klíčem k dobré chromatografii .

Špičková hlušina

Špičková hlušina

Možná příčina Řešení
Zablokovaná frita Vraťte proplach kolony (pokud je to povoleno) nebo vyměňte fritu (pokud je to povoleno) nebo kolonu vyměňte
Sloupec je prázdný Vyplnit prázdnotu
Rušivý vrchol Použijte delší kolonu nebo změňte mobilní fázi a/nebo selektivitu kolony
Nesprávné pH mobilní fáze Upravte pH. U bazických sloučenin poskytuje nižší pH obvykle symetričtější píky
Ukázka reakce s aktivními místy Přidejte činidlo pro iontové páry nebo těkavý základní modifikátor nebo vyměňte kolonu
Čelní čelo

Čelní čelo

Možná příčina Řešení
Nízká teplota Zvyšte teplotu kolony
Špatné rozpouštědlo vzorku Pro injekční rozpouštědlo použijte mobilní fázi
Přetížení vzorku Snižte koncentraci vzorku
Špatný sloupec Vraťte proplach kolony (pokud je to povoleno) nebo vyměňte vstupní fritu (pokud je povoleno) nebo vyměňte kolonu.
Rozdělené vrcholy

Rozdělené vrcholy

Možná příčina Řešení
Kontaminace na vstupu ochranné nebo analytické kolony Odstraňte ochranný sloupek a zkuste analýzu. v případě potřeby vyměňte ochranný sloup. Pokud je analytická kolona ucpaná, obraťte se a propláchněte (pokud je to povoleno). Pokud problém přetrvává, kolona může být znečištěna silně zadrženými nečistotami. Použijte vhodný postup obnovy (viz informace o péči o sloupec). Pokud problém přetrvává, je pravděpodobně ucpaný přívod. Vyměňte fritu nebo vyměňte kolonu.
Rozpouštědlo vzorku nekompatibilní s mobilní fází Vyměňte rozpouštědlo. kdykoli je to možné, vstřikujte vzorky v mobilní fázi.
Zkreslení větších vrcholů

Špičkové zkreslení může být způsobeno přetížením vzorku. Zmenšete velikost vzorku.

Zkreslení časných vrcholů

Zkreslení časně eluujících píku může být způsobeno nesprávným injekčním rozpouštědlem. Snižte injekční objem nebo použijte slabší injekční rozpouštědlo.

Ocas, rané vrcholy více než pozdější
Možná příčina Řešení
Extra-sloupcové efekty Proveďte výměnu systému (kratší, užší hadičky), použijte detekční celu s menším objemem
Zvýšený tailing s rostoucím k'
Možná příčina Řešení
Sekundární retenční efekty, režim obrácené fáze Přidejte triethylamin (základní vzorky) nebo přidejte acetát (kyselé vzorky) nebo přidejte sůl nebo pufr (iontové vzorky) nebo vyzkoušejte jinou kolonu.
Sekundární retenční efekty, režim normální fáze Přidejte triethylamin (zásadité sloučeniny) nebo přidejte kyselinu octovou (kyselé sloučeniny) nebo přidejte vodu (polyfunkční sloučeniny). Pouze pro metody s normální fází, které používají rozpouštědla mísitelná s vodou. Můžete také zkusit jinou metodu LC.
Sekundární retenční efekty, iontová párová chromatografie Přidejte triethylamin (základní vzorky)
Kyselý nebo bazický vrchol ocasu
Možná příčina Řešení
Nedostatečné ukládání do vyrovnávací paměti Použijte pufr o koncentraci 50 až 100 mM, použijte pufr s pKa rovným pH mobilní fáze
Extra vrcholy
Možná příčina Řešení
Vrcholy duchů Nečistoty ve vzorku, použitých činidlech nebo materiálu. Změňte postup čištění a/nebo zkontrolujte možný zdroj kontaminace (sklo, lahvičky, použitá činidla, rozpouštědla atd...)
Pozdní eluující pík z předchozí injekce Zvyšte dobu chodu nebo sklon sklonu a/nebo zvyšte průtok
Posun retenční doby

hodiny

Možná příčina Řešení
Špatná regulace teploty Použijte sloupový termostat. Pokud jej používáte, zkontrolujte jeho správnou funkčnost.
Změna mobilní fáze Zabránit změnám (vypařování, reakce atd...)
Špatná ekvilibrace kolony Mezi běhy ponechte více času na ekvilibraci kolony
Náhlé změny retenční doby
Možná příčina Řešení
Změna průtoku Resetujte průtok
Vzduchová bublina v čerpadle Vypusťte vzduch z čerpadla
Nesprávná mobilní fáze Vyměňte mobilní fázi za správnou a/nebo nastavte správnou směs mobilní fáze na ovladači
Posun základní linie
Možná příčina Řešení
Kolísání teploty kolony. I malé změny způsobují cyklický vzestup a pokles základní linie. Nejčastěji ovlivňuje index lomu, UV a vodivostní detektory s vysokou citlivostí Kontrolujte teplotu kolony a mobilní fáze, před detektorem použijte výměník tepla
Nehomogenní mobilní fáze. Posun základní linie je obvykle způsoben vyšší absorbancí, spíše než cyklickým vzorem z kolísání teploty. Používejte rozpouštědla, vysoce čisté soli a přísady. Mobilní fázi před použitím odplyněte, během použití prostříkejte héliem.
Nahromadění nečistot nebo vzduchu v detekční cele Propláchněte celu methanolem nebo jiným silným rozpouštědlem. V případě potřeby vyčistěte celu 1N HNO 3 (nikdy nepoužívejte HCl).
Zacpaná zásuvka za detektorem. Vysoký tlak poškozuje buňku a vytváří hlučnou základní linii. Odpojte nebo vyměňte vedení. Informace o výměně okna naleznete v příručce k detektoru.
Problém míchání mobilní fáze nebo změna průtoku Správné složení nebo průtok. Chcete-li se tomuto problému vyhnout, pravidelně sledujte složení a průtok.
Pomalá ekvilibrace kolony, zejména při změně mobilní fáze Před analýzou propláchněte středně silným rozpouštědlem, proveďte 10 až 20 objemů kolony nové mobilní fáze
Mobilní fáze kontaminovaná, poškozená nebo připravená z materiálů nízké kvality Příprava mobilní fáze Chack. Používejte chemikálie nejvyšší kvality a rozpouštědla pro HPLC
Silně zadržené materiály ve vzorku (vysoké k') mohou eluovat jako velmi široké píky a zdají se být rostoucí základní linií (analýzy gradientu mohou zhoršit problém). Použijte ochranný sloup. Pokud je to nutné, proplachujte kolonu silným rozpouštědlem mezi nástřiky nebo pravidelně během analýzy.
Mobilní fáze je recyklována, ale detektor není seřízen Resetovat základní linii. Při překročení dynamického rozsahu detektoru použijte novou mobilní fázi.
Detektor (UV) není nastaven na maximum absorbance, ale na sklon křivky Změňte vlnovou délku na maximum UV absorbance
Základní hluk (pravidelný)
Možná příčina Řešení
Vzduch v mobilní fázi, detekční buňka nebo čerpadlo Odplynění mobilní fáze. Proplachovací systém pro odstranění vzduchu z detekční cely nebo čerpadla.
Unikat Viz část Netěsnosti . Zkontrolujte systém, zda nejsou uvolněné armatury. Zkontrolujte čerpadlo, zda netěsní, nehromadí se sůl, nebo zda nevykazuje neobvyklý hluk. V případě potřeby vyměňte těsnění čerpadla.
Neúplné promíchání mobilní fáze Promíchejte mobilní fázi ručně nebo použijte méně viditelný vzorek.
Teplotní efekt (kolona při vysoké teplotě nebo nevyhřívaný detektor) Snižte diferenciál nebo přidejte výměník tepla
Další elektronická zařízení na stejné lince izolujte LC, detektor nebo rekordér/PC, abyste zjistili, zda je zdroj problému externí. Opravte podle potřeby.
Pulzace čerpadla Začlenit do systému tlumič pulsů.
Základní hluk (nepravidelný)
Možná příčina Řešení
Unikat Viz část Netěsnosti . Zkontrolujte systém, zda nejsou uvolněné armatury. Zkontrolujte čerpadlo, zda netěsní, nehromadí se sůl, nebo zda nevykazuje neobvyklý hluk. V případě potřeby vyměňte těsnění čerpadla.
Mobilní fáze kontaminovaná, poškozená nebo připravená z materiálů nízké kvality Zkontrolujte přípravu mobilní fáze
Rozpouštědla mobilní fáze nemísitelná Vybírejte a používejte pouze mísitelná rozpouštědla
Vzduch zachycený v systému Propláchněte systém silným rozpouštědlem
Vzduchové bubliny v detektoru Detektor čištění. Za detektorem nainstalujte protitlakové zařízení
Elektronika detektoru/rekordéru Elektronicky izolujte detektor a záznamník/PC. Pro odstranění problému viz návod k obsluze.
Detekční buňka kontaminována (i malé množství kontaminantů může způsobit hluk) Vyčistěte celu propláchnutím 1N HNO 3 (nikdy nepoužívejte HCl)
Slabá lampa detektoru Vyměňte lampu
Kolona prosakující oxid křemičitý nebo obalový materiál Vyměňte sloupek
Směšovač mobilní fáze je neadekvátní nebo nefunkční Opravte nebo vyměňte mixér nebo mix off-line, pokud je izokratický.
Široké vrcholy
Možná příčina Řešení
Složení mobilní fáze se změnilo Připravte novou mobilní fázi
Průtok mobilní fáze je příliš nízký Upravte průtok
Netěsnosti (zejména mezi kolonou a detektorem) Viz část Netěsnosti . Zkontrolujte systém, zda nejsou uvolněné armatury. Zkontrolujte čerpadlo, zda netěsní, nehromadí se sůl, nebo zda nevykazuje neobvyklý hluk. V případě potřeby vyměňte těsnění čerpadla.
Nastavení detektoru není správné Upravte nastavení
Koncentrace pufru je příliš nízká Zvyšte koncentraci pufru
Ochranný sloupek je znečištěný/opotřebovaný Vyměňte ochranný sloupek
Sloupec znečištěný/opotřebovaný. Nízké SPZ. Vyměňte sloupec za nový stejného typu.
Prázdné na vstupu do kolony Otevřete vstupní konec a vyplňte mezeru nebo vyměňte kolonu
Pík představuje dvě nebo více špatně rozlišených sloučenin Změňte typ kolony pro zlepšení separace
Teplota kolony je příliš nízká Zvyšte teplotu. Nepřekračujte 60 °C, pokud nejsou pro výrobce kolony přijatelné vyšší teploty.
Časová konstanta detektoru je příliš velká Použijte menší časovou konstantu

chrom Široké vrcholy mohou být způsobeny efekty mimo sloupec:

  • Kolona je přetížena - vstříkněte menší objem (např. 10 µl místo 100 µl) nebo nařeďte vzorek
  • Doba odezvy detektoru nebo příliš velký objem buňky – zkraťte dobu odezvy nebo použijte menší buňku
  • Hadička mezi kolonou a detektorem je příliš dlouhá, vnitřní průměr je příliš velký – použijte co nejkratší kus hadičky o vnitřním průměru 0,007" až 0,010" (UHPLC techniky vyžadují použití hadičky s vnitřním průměrem 0,005")
  • Příliš vysoká doba odezvy záznamníku – Zkraťte dobu odezvy
Ztráta rozlišení
Možná příčina Řešení
Mobilní fáze kontaminovaná (zhoršená (způsobuje změnu retenční doby) Připravte novou mobilní fázi
Ucpaná ochranná nebo analytická kolona Odstraňte ochrannou kolonu a pokuste se provést analýzu. V případě potřeby vyměňte kryt. Pokud je analytická kolona ucpaná, obraťte se a propláchněte. Pokud problém přetrvává, kolona může být znečištěna silně zadrženými nečistotami. Použijte vhodný postup obnovy podle návodu výrobce. Pokud problém přetrvává, je pravděpodobně ucpaný přívod. Vyměňte fritu nebo vyměňte kolonu.
Všechny vrcholy jsou příliš malé
Možná příčina Řešení
Příliš vysoký útlum detektoru Snižte útlum
Časová konstanta detektoru je příliš velká Použijte menší časovou konstantu
Velikost vstřiku je příliš malá Zvyšte koncentraci vzorku nebo zvyšte injekční objem, pokud to velikost kolony umožňuje
Nesprávné připojení rekordéru Použijte správné připojení
Všechny vrcholy jsou příliš velké
Možná příčina Řešení
Útlum detektoru je příliš nízký Použijte větší útlum
Velikost vstřiku je příliš velká Snižte koncentraci vzorku nebo snižte vstřikovaný objem, použijte menší vzorkovací smyčku nebo použijte částečné plnění smyčky
Nesprávné připojení rekordéru Použijte správné připojení

Problémy s injektorem

Manuální vstřikovač, těžko se otáčí
Možná příčina Řešení
Poškozené těsnění rotoru Přestavte nebo vyměňte těsnění/ventil
Rotor je příliš utažený Upravte napětí rotoru
Manuální vstřikovač, těžké naplnění

nářadí

Možná příčina Řešení
Špatně seřízený ventil Upravte zarovnání
Blokovaná smyčka Vyměňte smyčku
Špinavá injekční stříkačka Vyčistěte nebo vyměňte injekční stříkačku
Blokované linky Vymažte nebo vyměňte řádky
Vstřikovač autosampleru - neotáčí se
Možná příčina Řešení
Žádný tlak vzduchu ani síla Zajistěte správný tlak/výkon
Rotor je příliš utažený Upravit
Špatně seřízený ventil Upravte zarovnání
Autosampler - další problémy
Možná příčina Řešení
Ucpání Vyčistěte nebo vyměňte zablokovanou část
Zaseknutý mechanismus Viz servisní příručka
Vadný ovladač Opravte nebo vyměňte ovladač

Problémy zjištěné čichem, zrakem nebo zvukem

Vůně rozpouštědla
Možná příčina Řešení
Unikat Viz část Netěsnosti
Rozlít Zkontrolujte, zda nádoba na odpad nepřetéká, nebo vyhledejte únik a ukliďte
"Horký" zápach
Možná příčina Řešení
Modul přehřívání Zkontrolujte správnou ventilaci, upravte ji nebo zkontrolujte nastavení teploty, seřiďte nebo vypněte modul, viz servisní příručka
Abnormální stavy měřidel
Možná příčina Řešení
Abnormalita tlaku Viz část Abnormální tlak
Problém se sloupovou troubou Zkontrolujte nastavení a upravte, viz servisní příručka
Detekční lampa selhává Vyměňte lampu
Výstražné lampy
Možná příčina řešení
Překročen tlakový limit Zkontrolujte ucpání nebo zkontrolujte nastavení limitů a upravte je
Další výstražné kontrolky Viz návod k obsluze/servisu
Výstražné bzučáky

manuál

Možná příčina Řešení
Únik/rozlití rozpouštědla Najděte a opravte
Další varovné bzučáky Viz návod k obsluze/servisu
Skřípání a pískání
Možná příčina Řešení
Selhání ložiska Viz servisní příručka
Špatné mazání Podle potřeby namažte
Mechanické opotřebení Viz servisní příručka

Klíčové problémové oblasti a preventivní údržba

Nádrž
Problém Řešení/preventivní údržba
Zablokovaná vstupní frita Vyměňte každé 3 až 6 měsíců a filtrujte mobilní fázi přes 0,5µm filtr
Plynové bubliny Odplynění mobilní fáze
Čerpadlo
Problém Řešení/preventivní údržba
Vzduchové bubliny Odplyněte mobilní fázi, zkontrolujte těsnost
Selhání těsnění čerpadla Každé 3 měsíce vyměňte těsnění čerpadla
Selhání kontrolního ventilu Filtrujte mobilní fázi, použijte fritu ze vstupního potrubí. Nechte si jeden náhradní.
Injektor klíč
Problém Řešení/preventivní údržba
Opotřebení těsnění rotoru Vzorky příliš neutahujte a nefiltrujte

Sloupec
Problém Řešení/preventivní údržba
Zablokovaná frita Filtrujte mobilní fázi, filtrujte vzorky, použijte in-line filtr a/nebo ochrannou kolonu
Prázdný v čele sloupce Vyhněte se mobilní fázi pH>8 (většina kolon na bázi oxidu křemičitého), použijte ochrannou kolonu, použijte předkolonu (saturační kolonu)
Detektor
Problém Řešení/preventivní údržba
Selhání lampy Vyměňte lampu
Snížená odezva detektoru Žárovku pravidelně vyměňujte podle návodu k obsluze (uchovejte si náhradní žárovku)
Zvýšený šum detektoru Žárovku pravidelně vyměňujte podle návodu k obsluze (uchovejte si náhradní žárovku)
Bubliny v buňce Udržujte celu v čistotě nebo použijte omezovač po cele nebo odplynění mobilní fáze.
Všeobecné
Problém Řešení/preventivní údržba
Korozivní/abrazivní poškození Vypláchněte pufr z LC a vyčistěte, když se nepoužívá