Chromatografia

Preparatywne LC

Zadania preparatywnych i analitycznych systemów HPLC różnią się od siebie. Podczas gdy analityczna HPLC jest jakościowym i ilościowym oznaczeniem określonych związków w próbkach, zadaniem preparatywnej HPLC jest oddzielenie, oczyszczenie i izolowanie cennych produktów z mieszanin.

Chromatografię preparatywną można podzielić na trzy podstawowe obszary:

• Chromatografia flash
• Separacja półparatywna
• Okresowa chromatografia preparatywna (pilot lub produkcja)
• & Quot; True chromatografii przeciwprądowej & quot;
• " Symulowane ruchome łóżko " (SMB)
• Ciągła chromatografia

Definicja zakresu

Jak działa potrójna kwadrupola?

Zasada potrójnej kwadrupolu (TQ) została wyjaśniona w systemie EVOQ ™ firmy Bruker . Kluczowymi elementami systemu są:

• Osiowe intuicyjne źródło
• Aktywne skupienie jonów w Q1
• Droga jonowa bez optyki jonowej
• Kolumna zderzeniowa o geometrii 180 °
• Projekt eliptyczny
• Detektor zlokalizowany poza osią Q3

Odczynniki do UHPLC

Urządzenia UHPLC wymagają rozpuszczalników i chemikaliów o znacznie większej czystości niż rozpuszczalniki obecnie dostępne na rynku. Rozpuszczalniki ULC / MS, bufory i modyfikatory (Biosolve) mają maksymalną czystość wymaganą przez oprzyrządowanie:

• bardzo niskie przesunięcie sygnału UV w elucji gradientowej
• minimalna zawartość zanieczyszczeń
• najniższe tło (zawartość jonów) w detektorach MS
• mniej niż 100 ppb metali alkalicznych

Rozpuszczalniki do ULC / MS są filtrowane przez mikrofiltr o średnicy 0,1 μm, mają maksymalną pozostałość 1 ppm i są pakowane w atmosferze gazów obojętnych w celu zapewnienia dłuższej trwałości podczas przechowywania. Oprócz standardowego opakowania 2,5-litrowego, Biosolve oferuje również odczynniki do nano LC / MS:

• 500 ml acetonitrylu, metanolu i izopropanolu
• 1 l ultra-czystej wody
• 100 ml TFA

Aby uzyskać więcej informacji o dostarczonych odczynnikach, zapytaj naszych przedstawicieli lub nasze biura.

Čištění injektoru

WTRYSKIWACZ

• Udává se, že příčinu 85–90% problémů při analýze lze najít v inletu. Proto nezapomínejte pravidelně vyměňovat všechen spotřební materiál. Liner, septum i veškerá těsnění mají omezenou životnost!
• Někdy však výměna spotřebního materiálu ani zaříznutí kolony nestačí. Pak je nutno vyčistit wlot. Obecné pokyny naleznete níže, ale vždy se řiďte především pokyny svého výrobce!

Čištění

• Wlot zchlate. Teplota by neměla přesahovat 40°C.
• Vypněte průtok nosného plynu.
• Deinstalujte případný autosampler.
• Deinstalujte kolonu.
• Wlot Otevřete, vyjměte veškerý spotřební materiál.
• Pokud lze, je vhodnější odpojit splitovou větev pneumatyczne kého systému od inletu.
• Wlot nyní sestává pouze z kovové trubky, která může a nemusí být na konci zúžená.
• Existují různé nástroje, které lze použít k čištění (např. Restek). Pomocí takového kartáče a rozpouštědla- chlorid metylenu a metanol pohyby dolů a vzhůru vyčistěte wlot.
• Pomocí pipety prostříkněte inlet rozpouštědlem (rozpouštědlo pod inletem zachyťte do kádinky) a ujistěte se, že v inletu nezůstaly žádné částečky nečistot.
• Pro odstranění zbytků rozpouštědla nahřejte inlet na cca 65 °C.
• Przeinstaluj ponownie splitovou větev pneumatycznekého systému, nainstalujte nový spotřební materiál.
• Zapněte průtok nosného plynu. Zkontrolujte těsnost.
• Před zvýšením teploty nechte wlot alespoň 10minut proplachovat. Odstraníte tak zbytky kyslíku. Předčasným zvýšením teploty může dojít k aktivaci a znehodnocení nového spotřebního materiálu.

Czyszczenie czujki

FID

Znaczący hałas, przypadkowe piki duchów, niska czułość. Są to typowe cechy brudnego wykrywacza FID.

Najczęstszą przyczyną zanieczyszczenia FID jest krwawienie z kolumny. Spalona faza stacjonarna może osiadać na powierzchni dyszy detektora i powodować problemy. Jednak inne zanieczyszczenia są spalane na dyszy.

Czy chcesz wyczyścić czujkę?

Jednak problemy opisane powyżej nie muszą być spowodowane jedynie zanieczyszczeniem detektora. Kroki opisane poniżej pomogą wyeliminować inne potencjalne przyczyny.

Odgazowanie gazu nośnego i fazy stacjonarnej

Możliwe źródło zanieczyszczenia można znaleźć nie tylko w samym detektorze, ale także przed nim. Stacjonarne fazy kolumnowe, przegrody, zanieczyszczony wlot, zanieczyszczony gaz nośny ... Aby uniknąć tego źródła, podłącz wejście FID za pomocą wtyczki i włącz FID. Jeśli wystąpią problemy, poszukaj problemu poza czujnikiem. Nie ma potrzeby wymiany wkładki? Przegrody? Wyczyść wlot? Jaki jest stan kolumny? Czy masz czysty gaz nośny? Czy masz wyciek w systemie?

Wodór i powietrze

Nawet wodór i powietrze stosowane w FID mogą być źródłem zanieczyszczenia. Zwróć uwagę zwłaszcza, gdy pojawiły się problemy po wymianie cylindra.

Również niewłaściwy przepływ / ciśnienie tych dwóch gazów może być źródłem zwiększonego hałasu, zmniejszonej czułości i problemów z zapłonem FID. Sprawdź przepływy przez przepływomierz.

Układ elektryczny

Nawet zakłócenia elektryczne mogą mieć podobne objawy jak zabrudzony FID. Może to być uszkodzenie elektrody, zły kontakt lub interferencja z innymi urządzeniami w laboratorium.

Przed czyszczeniem

• Nie zapomnij odłączyć przewodu zasilającego!
• Pamiętaj, że wykrywacz może być gorący!
• Podczas demontażu FID należy zwrócić uwagę na części izolacyjne. Użyj szczypczyków, aby uniknąć zabrudzenia rąk lub rękawic. Uważaj na możliwe zadrapania.
• Pamiętaj, że czasami łatwiej jest wymienić dyszę, niż ją wyczyścić. Jest to szczególnie ważne, gdy dysza jest silnie zanieczyszczona i ryzyko zarysowania dyszy jest znacznie zwiększone.

Czyszczenie

• Usuń dyszę z FID.
• Umieścić go w łaźni ultradźwiękowej z wodą z detergentem i ultradźwiękiem przez około 5-10 minut.
• Do czyszczenia dyszy użyj odpowiedniego narzędzia lub odpowiedniego cienkiego drutu. Bądź ostrożny. Ewentualne zadrapania mogą prowadzić do zmiany kształtu płomienia, zwiększonego hałasu lub utraty czułości.
• Umieść dyszę z powrotem w kąpieli ultradźwiękowej i ultradźwiękowej na dodatkowe 5-10 minut. Od tej chwili do obsługi dyszy należy używać wyłącznie pincety.
• Przepłucz dyszę czystą wodą.
• Przepłucz dyszę niewielką ilością metanolu.
• Przepłukać dyszę powietrzem lub azotem.
• Pozwól dyszy wyschnąć.
• Złóż FID. Zwróć uwagę na dokręcanie. Upuszczenie dyszy może spowodować jej odkształcenie!
• Możesz dołączyć do kolumny po tym, jak pogrążyłeś się. Wskazane jest ogrzanie FID do temperatury o 10 ° C-40 ° C wyższej niż standardowa temperatura pracy detektora. Uważaj na maksymalny limit temperatury FID! Uważaj na maksymalną temperaturę roboczą kolumny!

Jak zachować czujkę FIT

• Nowa kolumna krwawi najbardziej. Zainstaluj kolumnę jak zwykle, ale pozostaw końcówkę detektora w piecu i kondycjonuj kolumnę. Następnie zainstaluj kolumnę w czujce.
• Używaj wysokiej jakości kolumn o niskim wykrwawieniu.
• Wilgoć i tlen w gazie nośnym uszkadzają stacjonarną fazę kolumny i powodują jej krwawienie. Używaj gazów o wysokiej czystości, sit molekularnych, pułapek ... Sprawdź szczelność obwodu gazu.
• Używaj odpowiedniej niskiej posocznicy i często je zmieniaj.

ECD

ECD jest detektorem specyficznym i czułym. Nieodpowiednie zachowanie może jednak znacznie zmniejszyć jego żywotność. Stopniowy wzrost sygnału jest normalny dla tego detektora. Ale jeśli pojawi się wzrost, przeskakuje lub dodaje kolejny z objawów: Redukcja szumów, Zmniejszenie czułości, poszukaj problemu.

Czyszczenie

• ECD zawiera materiał radioaktywny, dlatego wymagane są regularne testy zużycia. Zabronione jest otwieranie go i interweniowanie w jakikolwiek sposób.
• ECD można czyścić tylko termicznie. Zasadniczo czyszczenie odbywa się poprzez podgrzanie detektora ECD do temperatury zbliżonej do maksymalnej temperatury roboczej i wypalanego brudu. Przed czyszczeniem upewnij się, że nie ma wycieków w systemie. Temperatura stopniowo wzrasta. Obserwuj sygnał. Zwiększyć temperaturę o 10-20 ° C, sygnał zaczyna rosnąć. Zaczekaj, aż sygnał ustabilizuje się i zacznie spadać, a następnie ponownie zwiększ temperaturę. Po osiągnięciu żądanej temperatury poczekaj, aż sygnał spadnie do oczekiwanych wartości.
• Postępuj zgodnie z instrukcjami producenta, procedura może się różnić.
• W przypadku podgrzewania czujki za pomocą zainstalowanej kolumny nie należy przekraczać maksymalnej temperatury roboczej kolumny ani usuwać kolumny z wykrywacza i zastępować ją wtyczką.

Nie niszcz swojego wykrywacza!

• Używaj gazów dobrej jakości dla ECD.
• Użyj sit molekularnych, pułapek do oczyszczania gazów.
• W przypadku problemów - zwiększenie sygnału, pogorszenie jakości dźwięku, zmniejszenie czułości itp., Sprawdź szczelność systemu.
• Użyj wysokiej jakości kolonii i przegrody o niskim krwawieniu.

Wybór końcówki strzykawki

Wybór końcówki strzykawki zależy od tego, jakiej aplikacji ma użyć strzykawka. Poniższe zdjęcie pomoże Ci wybrać właściwą wskazówkę.

Technologia GC / MS TOF

Dlaczego warto wybrać Fast GC / MS?

Wymagania laboratoriów stale rosną, a ich zainteresowania są przede wszystkim:

• szybka analiza (większa wydajność, a tym samym efektywność i niższe koszty analizy)
• niskie granice wykrywalności (ze względu na wymagania nowych metod)
• wysoka jakość danych związana z coraz bardziej złożonymi macierzami

Pozwala na użycie wielowymiarowej (zrozumiałej) techniki GC, GCxGC/MS ma to ogromne zalety w przypadku złożonych próbek, w których standardowe systemy kwadrupolowe z jednej strony zawodzą z powodu ich prędkości, oraz z powodu ograniczeń w obszarze pełnej czułości m/z. Wiele rzeczywistych próbek w pracy wykazało, że w testach kontrolnych GCxGC/MS wykryto inne związki, które nie zostały zidentyfikowane, a standardowe techniki GC/MS doprowadziły do błędnych interpretacji.

Opis GC / MS-TOF

TOF vs. analizator kwadrupolowy

Wady GC i ich usuwanie

Zapobieganie

Wielu problemów z GC można uniknąć, prawidłowo instalując kolumnę i konserwację zapobiegawczą. Problemów można uniknąć w szczególności poprzez regularną wymianę przegrody i wkładki oraz konserwację wtryskiwacza i detektora. Wymagania dotyczące regularnej konserwacji prewencyjnej różnią się w zależności od modelu GC, instrukcje dotyczące właściwej konserwacji można znaleźć w instrukcji obsługi i serwisu.

Aby zidentyfikować możliwe problemy, zalecamy użycie elektronicznego przepływomierza i wykrywacza nieszczelności (wykrywacza nieszczelności).

Podstawowe problemy

Problemy z linią podstawową można podzielić na pięć kategorii: dryf, hałas, offset, wykres i fale.

• Dryf - wolne przesunięcie linii bazowej w jednym kierunku
• Hałas - (hałas) częste, losowe zmiany wysokości wyjściowej
• Przesunięcie (offset) - nagła niewyjaśniona zmiana w wysokości podstawowej
• Spikes - występowanie bardzo wąskich pików dodatnich i ujemnych
• Linia bazowa fali (wędrowanie) - szum niskiej częstotliwości

Dryf - Zmniejszanie sygnału

Dryf - wzrost sygnału

Hałas

Przesunięcie

Spisek

Podstawowa długość fali

Zniekształcone kształty szczytów

Zmniejszony obszar wszystkich szczytów

Zwarte szczytowe wartości szczytowe

Przed szczytem

Szczyt kolejki jest głównie wynikiem nakładania się kolumn. Rozcieńczyć próbkę, zmniejszyć wstrzykniętą ilość lub użyć kolumny o większej pojemności. Większe pojemności mają kolumny o większej średnicy i większej warstwie fazy stacjonarnej, ale rozdzielczość może być zmniejszona.

Pikny duchowe (fałszywe piki)

Niepowtarzalna powierzchnia lub wysokość piku.

Ujemne szczyty

Brak szczytów

Selektywna utrata czułości

Podziel pików

Niezręczne szczyty

Shift czas retencji

Utrata rozdzielczości

Szeroki pik rozpuszczalnika

Szybka degradacja kolumny

Instalacja kolumnowa

Szczegółowe informacje na temat instalowania kolumn GC można znaleźć tutaj .

Konserwacja prewencyjna

Czyszczenie wtryskiwaczy

Czyszczenie czujki

TOF vs. kwadrupol

W tym artykule pokażemy, dlaczego GC/MS-TOF jest bardziej wyrafinowaną techniką w nowoczesnych analizach GC / MS niż kilkadziesiąt lat w technologii wykorzystującej analizator kwadrupolowy.

1) Dlaczego TOF zapewnia lepsze dane?

Wyższy GC / MS Czas lotu oznacza większą liczbę widm dla piku chromatograficznego. Tak więc analityk ma więcej danych i dzięki unikalnemu algorytmowi dekonwolucji może identyfikować związki o podobnych właściwościach (izomery itp.), W których rozdzielczość widm masowych na jednostkę jest niewystarczająca.

TOF może pracować z analizą spektrum MS w zakresie m / z - dzięki dobrej czułości, nie ma potrzeby korzystania z trybu SIM i dlatego analityk nie traci jakościowych informacji o strukturze związku. Może to odgrywać ważną rolę w kontroli międzylaboratoryjnej lub gdy istnieją różnice między laboratoriami.

2) Większa czułość

Czas wolny Lot nie jest analizatorem skanującym, lecz pulsem. Dzięki wysokiej prędkości wypuszczania 30 kHz, widma mogą być gromadzone do 1000 / s, których nie może osiągnąć analizator kwadrupolowy. Ponadto kwadrupol musi powrócić do pierwotnej wartości pola elektrycznego po jednym skanie, co zajmuje kolejny "czas międzywymiarowy". To znacznie wydłuża średni czas jednego skanowania. Na przykład jeśli przeprowadzono analizę PBDE 100-1000 amu, system GC / MS z szybkością skanowania 20 000 amu / s, szybkość akwizycji danych wynosi <20specter / s. W przypadku analizatora TOF uzyskujemy tylko 200 widm / s, 10 razy więcej. Wyższa prędkość pozwala nie tylko na szybkie GC / MS, ale również na lepsze dane. Szybkie GC / MS zapewnia wyższe wartości szczytowe, lepszy stosunek sygnału do szumu. Ponadto, analizując związki takie jak PBDE, konieczne jest przeanalizowanie całych widm masowych, aw przypadku analizatora, tracimy bardzo dużo płynności EI.

3) Gospodarka drogowa

Za pomocą GC / MS-TOF osiągamy wysokie poziomy zbieżności widmowej, dzięki czemu możemy skrócić analizę o 3x do 4x przy użyciu odpowiedniej kolumny (0,10 lub 0,18 mm ID). Pozwoli to nam znacznie zaoszczędzić na czasie pracy przyrządu, zużyciu gazu nośnego i zwiększeniu przepustowości próbek. Może to nie tylko zwiększyć wydajność laboratorium, ale także przyspieszyć dostarczanie wyników analizy.

Linery dla GC

W przypadku większości chromatografów istotna jest powtarzalność rozpylania próbki i przeniesienie próbki z wtryskiwacza na kolumnę chromatograficzną o wysokiej jakości. jednym z parametrów, który ma duży wpływ na powtarzalność i jakość przenoszenia próbki na kolumnie chromatograficznej, jest typ wkładki GC . Wpływa na stabilność substancji w wysokiej temperaturze oraz na jakość materii i przenoszenie materii. Dlatego wybór wkładki GC jest bardzo ważny i bardzo zależy od zastosowanych technik natryskiwania. Tutaj znajdziesz ważne informacje, które pomogą Ci wybrać właściwą podkładkę GC .

Dezaktywacja Siltek

Ważne informacje na temat wtryskiwaczy

Nowa konstrukcja wkładki - FocusLiner ™

Przewodnik wyboru linii SGE

Wkładka obojętna TOPAZ ™ (Restek)