Хроматография

Стационарная фаза для ВЭЖХ

ASTRA - CHROMSERVIS

ARION - CHROMSERVIS

На нашем веб-сайте вы также найдете инструкции по уходу за колонками (U)ВЭЖХ Arion.

CHROMSHELL - CHROMSERVIS

КИНЕТЕКС - PHENOMENEX

*Колонки обладают стабильностью в диапазоне pH от 1,5 до 10 в изократических условиях. В градиентных элюциях их стабильность находится в диапазоне рН от 1,5 до 8,5.

Колонки Kinetex 2,6 мкм с внутренним диаметром 2,1 мм стабильны до давления 1000 бар, в противном случае — до 600 бар.

Попробуйте колонки ChromShell, которыми вы можете заменить колонки Kinetex.

ЛУНА – PHENOMENEX

БЛИЗНЕЦЫ – PHENOMENEX

СИНЕРГИЯ – PHENOMENEX

ОНИКС – PHENOMENEX

ЮПИТЕР – PHENOMENEX

Капиллярные/наноколонки для ЖХ ProteCol - SGE

Часто задаваемые вопросы о МетАмино

Какой тип мембраны внутри спинового фильтра?

• Мембрана изготовлена из нейлонового материала и имеет пористость 0,22 мкм. Его диаметр оптимизирован для использования с данным спиновым фильтром.

Можно ли расширить набор ^MetAmino® другими аналитами?

• Да, набор ^MetAmino® можно расширить. Свяжитесь с нами для получения подробной информации.

Могу ли я использовать набор ^MetAmino® для анализа мочи?

• Да, набор ^MetAmino® можно использовать для анализа мочи. Образец не должен содержать белков, поэтому перед использованием набора его необходимо обработать обычным способом (центрифугирование, фильтрация).

Можем ли мы заказать реагенты отдельно?

• Да, весь набор реагентов можно заказать под каталожным номером MAK-5857-L002 .

Какое давление во время анализа ЖХ/МС?

• В начале анализа давление 380 бар, в конце 200 бар.

Созданы ли MRM для аминокислот, перечисленных в наборе ^MetAmino®, после или до дериватизации стандартов?

• Переходы MRM для AA, перечисленные в руководстве, указаны как переходы производных AA, а не собственного AA.

Следует ли гидролизовать образец корма перед работой с набором ^MetAmino® ?

• Осаждение с использованием осаждающей среды (PM) не является необходимым шагом для успешной дериватизации образца. Набор тестировался в первую очередь для анализа биожидкостей, часто содержащих пептиды. Для предотвращения их осаждения в процессе дериватизации в протокол пробоподготовки был включен этап осаждения.
• Если требуется общий анализ свободных и связанных с пептидами аминокислот, в этом случае мы рекомендуем провести гидролиз образца, а затем высушить аликвоту гидролизованного образца в токе азота или в спидваке. Растворяют высушенный остаток в 25 мкл деионизированной воды или 0,1 М водного раствора HCl (для лучшей растворимости) и действуют согласно инструкции, добавляя 10 мкл раствора IS.
• Что касается гидролиза пептидов, используемые добавки (фенол, тиодигликоль) в среде гидролиза также могут быть дериватизированы (вероятно, не видны при « полном сканировании »). Поэтому мы рекомендуем 6M HCl в качестве среды гидролиза.

Можем ли мы заказать набор ^MetAmino® GC/MS для подготовки 400 образцов?

• Пока нет, в настоящее время у нас есть только набор ^MetAmino® GC/MS для подготовки 100 образцов. Этот комплект можно заказать под каталожным номером MAK-5857-BA01.

В таблице 78 аминокислот, некоторые из которых отсутствуют в доступных стандартных смесях — так должны ли мы полагаться на переходы MRM и смотреть на время удерживания, или это стандарты, которые мы должны купить, если мы хотим их определить?

• Для количественного определения набор MetAmino содержит - один флакон стандартного раствора SD1, входящего в состав набора, содержит 33 аминокислоты: AAA, ABA, ALA, APA, ARG, ASP, BAIBA, CC, CIT, CTH, GABA, GLU, GLY. , GPR, HIS, HLY, HYP, ILE, LEU, LYS, MET, 1MHIS, 3MHIS, ORN, PHE, PHP, PRO, SAR, SER, THR, TPR, TYR, VAL и SD2 во флаконе с лиофилизированной смесью 3 аминокислот : АСН, ГЛН, ГТО. Однако набор аминокислот может быть дополнительно расширен за счет других соединений, содержащих первичные или вторичные функциональные аминогруппы.
• Массы (m/z), указанные в руководстве, верны и представляют собой ионы M+H+. Массы (m/z) и время удерживания из руководства были получены с помощью прибора с линейной ионной ловушкой LTQ, а данные из Сертификата анализа были получены с прибора Q Exactive plus HRMS. В обоих случаях использовали одну и ту же колонку, скорость потока и состав подвижной фазы. Время удерживания (ВУ) является экспериментальным значением, и расхождения, особенно для соединений с поздним элюированием, могут быть вызваны использованием разных приборов ЖХ/МС.

Capillary GC column installation

Краткая процедура установки колонки

• Охладите все нагреваемые зоны ГХ
• Проверьте газоочистители и, если они израсходованы, замените их.
• Очистите инжектор и детектор
• Замените вкладыши инжектора/детектора на новые.
• Замените важные уплотнения инжектора и детектора.
• Замена септы в форсунке.
• Установите расход подпиточного газа и газа детектора.
• Внимательно осмотрите колонку на наличие повреждений или поломок.
• Установите гайку и феррулу на каждый конец колонки.
• Отрежьте по 10 сантиметров с каждого конца столбика. Для разрезания капиллярных колонок из плавленого кварца используйте сапфировую палочку или керамическую пластину. Используйте зазубренный край керамической пластины для надрезов или край острого напильника, чтобы разрезать металлические капиллярные колонки. См. наш каталог инструментов для резки капилляров.
• Установите капиллярную колонку в печь с помощью кронштейна, который защищает колонку от царапин и истирания.
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние во входное отверстие, как указано в руководстве к прибору.
• Установите колонку так, чтобы капилляр не касался стенок печи.
• Установите приблизительную скорость потока в колонке, отрегулировав давление напора до значения, указанного на тестовой хроматограмме, прилагаемой к колонке.
• Установите разделенный вентиль, продувку септы и любые другие применимые входные газы в соответствии со спецификациями прибора.
• Подтвердите поток, погрузив выход колонки во флакон с растворителем (ацетон или изопропиловый спирт).
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние в детектор, как указано в руководстве к прибору.
• Проверьте наличие утечек на входе и выходе с помощью течеискателя по теплопроводности. Не используйте мыло или течеискатели на жидкой основе, иначе колонка может быть повреждена.
• Установите температуры инжектора и детектора. Включите детектор, когда температура уравновесится. Внимание - не превышайте максимальную рабочую температуру фазы!
• Чтобы установить правильное мертвое время (линейную скорость), введите метан или неудерживаемое вещество, совместимое с используемым детектором.
• Проверьте целостность системы, проверив пик мертвого объема. Он не должен хвоста.
• Подготовьте колонку при максимальной рабочей температуре, чтобы стабилизировать базовую линию. (См. тестовую хроматограмму, прилагаемую к колонке, для максимальной температуры.)
• Установите печь на соответствующую температуру и введите метан или соответствующее неудержанное вещество, опять же, чтобы установить правильную линейную скорость.
• Введите дубликат исходной тестовой смеси или вашей конкретной тестовой смеси, чтобы убедиться в правильной установке, работе системы и колонки.
• Откалибруйте прибор и введите образцы.

Примечание. Если колонка новая, необходимо выполнить процедуру кондиционирования перед установкой надлежащего мертвого времени.

GC Column conditioning

Кондиционирование при повышенных температурах без потока приведет к необратимому повреждению или нарушению работы капиллярной колонки. Кондиционирование с присутствующей утечкой кислорода вызывает унос колонки и снижает ее полезность при высоких рабочих температурах. Поэтому перед кондиционированием столбца:

• Проверьте правильность настроек потока газа-носителя.
• Проведите тест на утечку, чтобы убедиться, что в системе нет кислорода.

Кондиционирование колонки ГХ:

• Установите колонку на инжектор. Не подключайте колонку к детектору. Оставьте конец колонки в печи ГХ.
• Установите печь ГХ на 40°C.
• Держите эту температуру 15 минут
• Установите температурный градиент на 10°C/мин.
• Установите максимальную рабочую температуру на 20°C выше конечной температуры температурной программы ГХ (максимальная температура должна быть на 25°C ниже максимальной рабочей температуры колонки) *
• Оставьте колонку при высокой температуре в духовке на ночь, пока базовая линия не стабилизируется. Если колонка предварительно кондиционирована, оставьте ее при максимальной температуре на 2 часа, пока базовая линия не стабилизируется.

^* Примечание. Для предварительно подготовленных колонок нет необходимости в кондиционировании в течение ночи. Внимательно прочтите инструкции по кондиционированию, предоставленные производителем колонки. Они имеют приоритет перед общей рекомендацией по кондиционированию, приведенной выше.

EasyFlash колонки

Chromservis выпустила новые колонки EasyFlash для высокоэффективной флэш-хроматографии. В этой статье вы узнаете о преимуществах флэш-хроматографии.

ВЭЖХ-соединения (TN #539)

В этом техническом примечании показаны возможные типы соединения между колонкой и системой ВЭЖХ. Плохое соединение может повлиять на разделение пиков, и его следует избегать. Правильное подключение представлено ниже .

How the Triple Quadrupole works?

Принцип тройного квадруполя (TQ) объясняется в системе EVOQ™ компанией Bruker . Ключевыми моментами системы являются:

• Осевой источник ионов
• Активная фокусировка Q1
• Безлинзовый ионный путь
• Ячейка столкновения 180 °
• Эллиптический дизайн
• Внеосевой детектор

GraceResolv

Картриджи PuriFlash ^® Flash

Interchim разработала новую методику флэш-хроматографии - Ultra Performance Flash Purification (UPFP) с использованием специальных флэш-картриджей. Флэш-картриджи имеют форму кремнезема обычной или неправильной формы. UPFP позволяет проводить очистку с высокой чистотой продукта и меньшим использованием растворителя.

Препаративная ЖХ

Задачи препаративной и аналитической ВЭЖХ-систем отличаются друг от друга. Если задачей аналитической ВЭЖХ является качественное и количественное определение определяемых соединений в пробах, то задачей препаративной ВЭЖХ является разделение, очистка и выделение ценных продуктов из смесей.

Препаративную хроматографию можно разделить на три основных направления:

• Флэш-хроматография
• Полупрепаративное разделение
• Периодическая препаративная хроматография (полуоперативная или производственная)
• «Истинная противоточная хроматография».
• « Имитация движущейся кровати » (SMB)
• Непрерывная хроматография

Определение области действия

Препаративная хроматография может быть объединена с флэш-хроматографией в одной системе - очистительном хроматографе. Система PuriFlash (Advion-Interchim) предлагает различные режимы работы:

• Препаративный режим + режим Flash
• Два режима вспышки
• Два подготовительных режима

Введение

Аминокислоты являются ключевыми строительными блоками жизни и играют ключевую роль в различных метаболических путях. В основном они действуют как промежуточные соединения, часто не задействуя напрямую белки. Из-за их химической сложности и динамического диапазона их надежный количественный и качественный анализ в биологических жидкостях и тканях имеет решающее значение для получения информации о питании, идентификации соединений и диагностики.

С этой целью был разработан простой, элегантный и на сегодняшний день самый быстрый метод анализа незаменимых аминокислот. Набор Metamino® на основе ЖХ/ГХ-МС предлагает комплексное решение до 75 метаболитов, включая основные протеиногенные аминокислоты, биогенные амины и коферменты, с возможностью дальнейшего расширения аналитов.