Хроматография

Setting linear velocity

Линейная скорость является важным параметром в хроматографии. Он влияет на разрешение хроматографии, поэтому установка мертвого объема является основной частью разработки метода.

Измерение линейной скорости в ГХ

Чтобы установить мертвое время, введите 2 мкл неудерживаемого газообразного вещества, совместимого с детектором. Возьмите газонепроницаемый шприц и нанесите свободное пространство над чистым соединением. Точно отметьте время начала инъекции и пиковое время элюирования.

Примечание. Некоторые соединения могут немного задерживаться на толстопленочной фазе, однако они будут воспроизводимы для аналогичных типов колонок.

Handling chiral columns

Использование и уход за колонкой Lux

Доставка Растворитель

н-гексан/2-пропанол (9:1, об./об.)

Сертификат тестирования

Каждая колонка проходит индивидуальное тестирование перед отправкой. К каждой колонке прилагается сертификат испытаний, показывающий параметры разделения трансстильбеноксида.

Совместимость с подвижной фазой

Колонки Lux можно использовать с нормальной фазой (алкан/спирт), обращенной фазой (водный метанол, водный ацетонитрил или соответствующие смеси буфера/метанола или буфера/ацетонитрила), а также с чистыми полярными органическими растворителями (низкомолекулярные спирты, ацетонитрил или их смеси). смеси).

Переключение растворителя

При переходе с одной подвижной фазы на другую необходимо применять соответствующую процедуру промывки колонки. Для этой промывки необходимо тщательно учитывать смешиваемость различных компонентов подвижной фазы. Для безопасного перевода колонки с гексана на метанол (или ацетонитрил) или с метанола (или ацетонитрила) на гексан используйте 100 % 2-пропанол в качестве переходного растворителя при скорости потока 0,2–0,5 мл/мин. Десяти объемов колонки с 2-пропанолом (т.е. 25 мл для колонки с внутренним диаметром 250 x 4,6 мм или 15 мл для колонки с внутренним диаметром 150 x 4,6 мм) достаточно для полного удаления старой подвижной фазы. Чтобы безопасно перевести колонку с нормальной фазы на обращенную фазу, промойте колонку 100 % 2-пропанолом со скоростью 0,2–0,5 мл/мин в количестве не менее десяти объемов колонки. Кроме того, если добавка буферной соли к подвижной фазе RP нерастворима в 2-пропаноле, перед переключением на буферную подвижную фазу колонку следует ненадолго промыть водой. Мы рекомендуем использовать специальные колонки Lux для работы с обращенной фазой, что позволяет избежать необходимости преобразования колонок, используемых в режиме элюирования с нормальной фазой, в обращенную фазу или наоборот.

Использование модификаторов подвижной фазы

Для основных образцов или кислых хиральных соединений может потребоваться использование соответствующего модификатора подвижной фазы для достижения хирального разрешения и обеспечения правильной формы пиков. Диэтиламин, этаноламин и бутиламин в диапазоне концентраций 0,1–0,5 % можно использовать с основными аналитами, а трифторуксусную или уксусную кислоту (0,1–0,5 %; обычно 0,1–0,2 %) с кислыми аналитами. Допустимы смеси основных и кислотных добавок подвижной фазы (например, ацетат диэтиламина или трифторацетат). Колонки Lux будут давать стабильные результаты при работе с подвижными фазами, содержащими добавки в указанных выше концентрациях. Однако при использовании колонки в сочетании с этими добавками может произойти ограниченное снижение эффективности колонки. Поэтому мы советуем посвящать колонки подвижным фазам, содержащим основные добавки. Ограничения по подвижной фазе Хиральные неподвижные фазы Lux получают путем покрытия силикагеля различными производными полисахаридов. Следовательно, следует избегать любого растворителя, растворяющего производное полисахарида (такого как тетрагидрофуран, ацетон, хлорированные углеводороды, этилацетат, диметилсульфоксид, диметилформамид, N-метилформамид и т. д.), даже в следовых количествах (например, даже в качестве растворителя пробы).

Рабочее противодавление

Скорость потока подвижной фазы должна быть установлена таким образом, чтобы противодавление в колонке оставалось ниже 300 бар (4300 фунтов на кв. дюйм). Это максимальное противодавление не должно превышаться в течение длительных периодов времени.

Рабочие температуры

Со стандартными подвижными фазами (такими как алкан/спирт) колонку можно использовать в диапазоне температур 0–50 °C.

Хранилище столбцов

Хранение колонки в течение более длительного периода времени рекомендуется в смеси н-гексан/2-пропанол (9:1, объем/объем). Колонки, используемые в обращенно-фазовых условиях, должны быть сначала промыты водой (если буферная соль использовалась в качестве подвижной фазы ОФ), а затем метанолом (или метанолом, только если соль не использовалась). Колонку можно хранить в метаноле.

Продление срока службы и восстановление

Phenomenex рекомендует использовать защитные картриджи SecurityGuard™ для продления срока службы вашей колонки, особенно при извлечении образцов из сложных матриц. В идеале образцы должны быть полностью растворены в подвижной фазе или отфильтрованы через шприцевой фильтр с размером пор примерно 0,45 мкм.

Hints and tips

Этот сайт содержит техническую информацию, советы и подсказки для вашего решения, а также рекомендации по выбору подходящих принадлежностей для хроматографии.

• Улучшение входного уплотнения ГХ Agilent
• Динамическое свободное пространство
• Процедура кондиционирования колонки для ГХ
• Установка колонки ГХ
• ГХ вкладыши
• Выбор септ для ГХ
• Процедура деактивации стеклянной посуды
• Как улучшить соединения капиллярных колонок ГХ
• Как увеличить отношение сигнал/шум в системах GC
• Как установить оптимальную линейную скорость
• Как обращаться с хиральными колонками для ВЭЖХ
• Улучшение эффективности разделения ЖХ
• Выбор колонки ЖХ
• Уход за шприцем
• Выбор наконечника шприца
• Термическая десорбция

Dynamic Headspace

Динамическое свободное пространство (DHS) можно использовать для широкого спектра экологических приложений. Загрязняющие вещества могут быть обнаружены в питьевой воде, речной воде и сточных водах. Эти матрицы включают химические вещества различной полярности и летучести, такие как хлорированные углеводороды, ароматические соединения, оксигенаты и т. д. Динамическое свободное пространство также можно использовать для других целей:

• характеристика специй, трав, пищевых продуктов, мыла
• остаточный мономер и другие летучие органические соединения в полимерах
• остаточные растворители в пищевой упаковке
• тестирование продукта с «зеленой этикеткой»
• OVI в фармацевтических продуктах
• следы примесей в активных фармацевтических ингредиентах
• метаболиты в биологических жидкостях (ароматические углеводороды в моче, бензол в крови)

Capillary GC column installation

Краткая процедура установки колонки

• Охладите все нагреваемые зоны ГХ
• Проверьте газоочистители и, если они израсходованы, замените их.
• Очистите инжектор и детектор
• Замените вкладыши инжектора/детектора на новые.
• Замените важные уплотнения инжектора и детектора.
• Замена септы в форсунке.
• Установите расход подпиточного газа и газа детектора.
• Внимательно осмотрите колонку на наличие повреждений или поломок.
• Установите гайку и феррулу на каждый конец колонки.
• Отрежьте по 10 сантиметров с каждого конца столбика. Для разрезания капиллярных колонок из плавленого кварца используйте сапфировую палочку или керамическую пластину. Используйте зазубренный край керамической пластины для надрезов или край острого напильника, чтобы разрезать металлические капиллярные колонки. См. наш каталог инструментов для резки капилляров.
• Установите капиллярную колонку в печь с помощью кронштейна, который защищает колонку от царапин и истирания.
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние во входное отверстие, как указано в руководстве к прибору.
• Установите колонку так, чтобы капилляр не касался стенок печи.
• Установите приблизительную скорость потока в колонке, отрегулировав давление напора до значения, указанного на тестовой хроматограмме, прилагаемой к колонке.
• Установите разделенный вентиль, продувку септы и любые другие применимые входные газы в соответствии со спецификациями прибора.
• Подтвердите поток, погрузив выход колонки во флакон с растворителем (ацетон или изопропиловый спирт).
• Вставьте колонку на соответствующее расстояние в детектор, как указано в руководстве к прибору.
• Проверьте наличие утечек на входе и выходе с помощью течеискателя по теплопроводности. Не используйте мыло или течеискатели на жидкой основе, иначе колонка может быть повреждена.
• Установите температуры инжектора и детектора. Включите детектор, когда температура уравновесится. Внимание - не превышайте максимальную рабочую температуру фазы!
• Чтобы установить правильное мертвое время (линейную скорость), введите метан или неудерживаемое вещество, совместимое с используемым детектором.
• Проверьте целостность системы, проверив пик мертвого объема. Он не должен хвоста.
• Подготовьте колонку при максимальной рабочей температуре, чтобы стабилизировать базовую линию. (См. тестовую хроматограмму, прилагаемую к колонке, для максимальной температуры.)
• Установите печь на соответствующую температуру и введите метан или соответствующее неудержанное вещество, опять же, чтобы установить правильную линейную скорость.
• Введите дубликат исходной тестовой смеси или вашей конкретной тестовой смеси, чтобы убедиться в правильной установке, работе системы и колонки.
• Откалибруйте прибор и введите образцы.

Примечание. Если колонка новая, необходимо выполнить процедуру кондиционирования перед установкой надлежащего мертвого времени.

Unit Conversions

Диаграмма объема капилляров ВЭЖХ

УФ-отсекающая добавка для подвижной фазы

Unit conversions and tables

Преобразование единиц измерения:

• Полезные таблицы в хроматографии
• Кислоты и основания pK, используемые в качестве добавок для подвижных фаз в ВЭЖХ
• УФ-отсечка компонентов подвижной фазы
• Выбор колонки на основе объема впрыска и емкости колонки
• Выбор капилляра для разных скоростей потока
• Калькулятор ChromShell (ГОТОВИМ)
• Прогнозирование давления в зависимости от размера частиц, длины и диаметра колонки
• Вязкость смесей растворителей
• Свойства растворителей для ВЭЖХ
• Преобразование размера частиц

Dosing pumps

Дозировочные насосы

Дозировочные насосы используются во многих областях, в лабораториях и в промышленности. Часто мы видим потребности, когда нам требуются дозированные жидкости при определенных условиях:

• Дозирование под высоким давлением (реакционные камеры, аппараты)
• Дозирование при высоких температурах
• Введение реактивных веществ
• Дозирование вязких сред

Для всех вышеперечисленных применений можно использовать технологию, проверенную в области высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Это двухпоршневые насосы AZURA (Knauer), в которых используются сферические поршни, обеспечивающие точное непрерывное дозирование под высоким давлением. Эти насосы могут работать с расходом от 0,01 до 1000 мл/мин, при температурах от -10°С до +120°С и с вязкими средами до 1000 мПа.с.

Насосы могут быть специально оборудованы, чтобы их можно было использовать в особых условиях, например во взрывоопасных зонах.

Хорошим примером использования насосов AZURA является дозирование триоксида серы в производстве метансульфокислоты (МСК).

Материалы

Головка насоса доступна из следующих материалов:

• Керамический
• Хастеллой C-276
• Нержавеющая сталь
• Титан
• Нержавеющая сталь/титан

Дополнительная информация о моделях доступна здесь .

Лазин ТОПАЗ

True Blue Performance

Деактивация Topaz ™:

• Запатентованная химическая дезактивация вкладыша газовой фазы
• Деактивация ваты в линии
• Доступный в популярных проектах и в синем отличительном цвете
• Высокая инерция, низкая дискриминация активных аналитов
• Симметричная форма как кислых, так и основных аналитов
• Повышенная точность и повторяемость результата
• Уменьшение пределов обнаружения

Многие хроматографические проблемы, такие как плохой отклик, отсутствующие или хвостатые пики, связаны с активностью в распылительной прокладке. Эти побочные эффекты затрудняют идентификацию и количественную оценку, особенно для анализа следов. Кроме того, линия вкладышей TOPAZ ™ Restek предлагает исключительную инерцию, улучшенный перенос аналита на хроматографической колонке и более высокую пиковую симметрию. Высокая инерция вкладышей TOPAZ ™ обеспечивается уникальным процессом дезактивации, который обеспечивает пассивацию поверхности вкладыша и кварцевой ваты внутри, что приводит к минимальному влиянию реакционноспособных аналитов.

Некоторые типы дезактивации, такие как основы, эффективны только для выбранной группы соединений. С другой стороны, сбалансированная технология вкладышей TOPAZ ™ деактивирует взаимодействие многих химических соединений. Типичной демонстрацией высокой инерции является разложение Эндрина и ДДТ в инжекторе, где линия TOPAZ ™ имеет только 4,8% разложения Эндрина и 1,3% разложения ДДТ. По сравнению с другими технологиями дезактивации это половина или даже треть потери аналита!

Выберите вкладыши в соответствии с устройством, которое вы используете здесь .