Krimpovací vialky jsou výbornou vzorkovnicí pro automatické dávkovače plynových a kapalinových chromatografů a pro skladování vzorků nebo kalibračních roztoků. Technika jejich uzavírání je velmi důležitá pro správnou těsnost. Díky netěsnosti způsobené nesprávným uzavřením, může dojít k odpaření rozpouštědla nebo ke ztrátě analytů.
Správně uzavřená vialka se pozná podle toho, že se její víčko po uzavření protáčí ztěžka a septum je rovné.
Vialka, která je uzavřená příliš velkou silou se pozná podle toho, že jejím víčkem nelze zpravidla vůbec otáčet a navíc má prohnuté septum (směrem dovnitř). Dojde-li k propíchnutí septa jehlou mikrostříkačky, dojde k velkému namáhání septa a tím k narušení těsnosti vialky.
Vialka, která nemá správně uzavřené víčko, díky malé síle krimpovacích kleští, se projevuje snadným otáčením víčka a v některých případech i neobepnutým hliníkovým materiálem kolem spodního okraje límce vialky.
Správnou sílu uzavíracích kleští můžete nastavit.
U starších typů kleští se nastavení síly provádí otáčením imbusového klíče uvnitř čelistí. Kleště mívají i dorazový šroub, kterým se nastavuje bezpečnostní vzdálenost, aby nedošlo k použití příliš vysoké síly a tím k netěsnosti nebo dokonce k mechanickému poškození vialky.
Aminokyseliny jsou klíčovými stavebními kameny života a hrají klíčovou roli v různých metabolických drahách. Vzhledem k jejich chemické složitosti a dynamickému rozsahu je jejich spolehlivá kvantitativní a kvalitativní analýza v biologických tekutinách a tkáních zásadní pro nutriční informace, identifikaci sloučenin a diagnostiku.
Za tímto účelem byla vyvinuta jednoduchá, elegantní a dosud nejrychlejší metoda pro analýzu aminokyselin. Kit MetAmino® na bázi LC/GC-MS nabízí komplexní řešení pro 75 metabolitů včetně základních proteinogenních aminokyselin, biogenních aminů a koenzymů s možností dalšího rozšíření analytů.
Obr. 1: Chromatogram vnitřních standardů, SD1 a SD2. Separace 5 nmol aminokyselin pomocí LC-MS MetAmino®
Obr. 2: Chromatogram reálného vzorku: Separace aminokyselin ve vzorku piva Budvar 12˚ (25 µl vzorku bylo nastříknuto na kolonu). Vysoká účinnost naší kolony a vysoké rozlišení přispívají k pěkné separaci píků. Vzorek testován pomocí LC-MS MetAmino®
Obr. 3: Chromatogram reálného vzorku: Separace aminokyselin přítomných v krevním séru (25 µL vysráženého séra bylo nastříknuto na kolonu). Vysoká účinnost naší kolony a vysoké rozlišení přispívají k pěkné separaci píků. Vzorek testován pomocí LC-MS MetAmino®
Níže je uvedený stručný postup přípravy vzorku. Podrobný postup naleznete v uživatelské příručce MetAmino®.
MetAmino® kit obsahuje všechna činidla, média a chemikálie. Obsah startovací sady je uveden v tabulkách níže:
Položka | Typ vialky | Objem ve vialce (ml) | Počet vialek (100 vzorků) |
Standardy aminokyselin SD1 roztok | 2 ml vialka | 0,25 | 1 |
Standardy aminokyselin SD2 v práškové formě | 2 ml vialka | - | 2 |
Roztok s vnitřními standardy (IS) | 2 ml vialka | 1,1 | 1 |
Aminokyselinové standardní ředící médium (AASDM) | 4 ml vialka | 1,4 | 1 |
Aktivační médium sorbentu MSPE (WES) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Ekvilibrační médium sorbentu MSPE (EQS) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Katalytický roztok (CTS) | 4 ml vialka | 2,2 | 1 |
Reagenční (derivatizační) činidlo (RDS) | 4 ml vialka | 1,1 | 1 |
Ředicí a promývací médium (DWM) | 40 ml vialka | 33 | 2 |
Eluční médium (ELM) | 40 ml vialka | 22 | 1 |
Precipitační médium (PM) | 40 ml vialka | 11 | 1 |
Položka | Množství (100 vzorků) | Poznámka |
MetAmino® HPLC kolona | 1 ks | Speciální stacionární fáze |
Stojánek až pro 80 centrifugačních zkumavek | 1 ks | |
Microspin filtry se sorbentem MetAmino® | 100 ks | Vnitřní kolonka vč. 0,22µm membrány |
Centrifugační zkumavky (2 ml) | 400 ks | |
Autosamplerové vialky (9 mm šroubovací uzávěr) | 100 ks | Včetně sept a víček |
Položka | Typ vialky | Objem ve vialce (ml) | Počet vialek (100 vzorků) |
Standardy aminokyselin SD1 (roztok) | 2 ml vialka | 0,25 | 1 |
Standardy aminokyselin SD2 v práškové formě | 2 ml vialka | - | 2 |
Roztok s vnitřními standardy (IS) | 2 ml vialka | 1,1 | 1 |
Aminokyselinové standardní ředící médium (AASDM) | 4 ml vialka | 1,4 | 1 |
Redukční činidlo (RA) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Základní roztok (BM) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Katalytický roztok (CTS) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Reagenční (derivatizační) činidlo (RDS) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Extrakční médium (EM) | 40 ml vialka | 5,5 | 1 |
Kyselé médium (AM) | 4 ml vialka | 2,75 | 1 |
Položka | Množství | Poznámka |
MetAmino® GC kolona | 1 ks | Speciální stacionární fáze |
Reakční skleněné zkumavky | 100 ks | - |
Stojánek až pro 80 reakčních zkumavek | ||
Autosamplerové vialky (9 mm šroubovací uzávěr) | 100 ks | Včetně sept a víček |
Inserty do vialek autosampleru | 100 ks | - |
Naše sady MetAmino® LC-MS a GC-MS poskytují rychlou, robustní, reprodukovatelnou a precizní metodu pro analýzu aminokyselin, která zahrnuje jak přípravu vzorků, tak i chromatografickou separaci.
Metoda využívající LC-MS je založena na mikro-extrakci na pevné fázi využívající speciální mikrospin filtry (MSPE) s nově vyvinutým sorbentem a integrovanou membránou 0,22 µm, metoda GC-MS využívá pro přípravu mikroextrakci kapalina-kapalina (LLME). Po této předúpravě je vzorek analyzován v LC-MS (GC-MS). Celkově trvá příprava vzorku pro LC-MS asi 8 minut a analýza vzorku 12 minut, takže celá doba experimentu je pouhých 20 minut. Celková doba experimentu GC-MS je dokonce kratší – zhruba 17 minut.
Tato jedinečná sada splňuje všechny požadavky laboratoří a je navržena pro všechny koncové uživatele, kteří hledají jednoduchou analytickou metodu a vysokou účinnost separace.
Sorbenty pro techniku MSPE jsou zvoleny tak, aby pokryly co nejširší pole aplikací. MSPE SpeExtra C18 je hydrofóbní typ oktadecyl silikagelu se speciálním endcappingem s velmi širokým uplatněním. Je vhodný pro celou řadu analytů, horší retenci vykazuje pro polární sloučeniny. MSPE SpeExtra C18-P je polárně modifikovaný monomerní oktadecyl silikagel . Nabízí různé typy interakcí: dipól-dipól, π- π a hydrofóbní. Je tedy vhodný pro aromatické a polární sloučeniny. MSPE SpeExtra HLB polymerní sorbent s vysokým měrným povrchem a speciálním endcapoingem. Má hydrofilní a lipofilní modifikaci zajišťující univerzální použití a vyšší kapacitu než C18 silikagel.
MSPE sorbent | Velikost částic [µm] | Měrný povrch [m2/g] | ||
C18 | 60 | 310 | ||
C18-P | 60 | 310 | ||
HLB | 30 | 850 |
Konopí obsahuje stovky kanabinoidů, přičemž kanabidiol (CBD) je v rostlině nejrozšířenější a Δ 9-Tetrahydrocannabinol (THC) je aktivní složkou způsobující psychotropní účinky. Existuje však mnohem více sloučenin, které jsou vytvářeny rostlinou konopí a byly zkoumány pro jejich lékařské účinky. Tento limit často vyžaduje úpravu destilovaného konopného extraktu (odstranění THC z výchozího extraktu) a lze ji dosáhnout pomocí preparativní chromatografie, např. pomocí systému puriFlash® XL-Cannabis. HPLC analýza výchozího materiálu (destilátu), frakcí shromážděných během procesu čištění a konečného produktu může být provedena analytickým systémem Advion AVANT HPLC-UV. Jak čištění, tak analytické metody jsou uvedeny v této božuře a tvoří kompletní řešení pro odstranění THC v konopném průmyslu.